Тезисы докладов на конференциях
полные тексты избранных публикаций
НЕСПЕЦИФИЧЕСКАЯ АНТИРАДИКАЛЬНАЯ АКТИВНОСТЬ НИЗКОМОЛЕКУЛЯРНЫХ И БЕЛКОВЫХ КОМПОНЕНТОВ ПЛАЗМЫ КРОВИ
АРТЕМЬЕВА Ю.С., РОГАЧЁВА Е.П.
Волгоградский государственный медицинский университет, кафедра теоретической биохимии с курсом клинической биохимии
Тезисы доклада, представленного на 4-й национальной научно-практической конференции с международным участием «Активные формы кислорода, оксид азота, антиоксиданты и здоровье человека» (Смоленск, 26-30 сентября 2005).
Показано, что антирадикальная активность (АРА) плазмы крови человека, определяемая по степени торможения реакции автоокисления кверцетина в щелочных условиях, преимущественно ассоциирована с одним из минорных белковых компонентов альбуминовой фракции плазмы (фракция V по Кону). Низкомолекулярные водорастворимые антиоксиданты плазмы в данной модели оценки АРА в физиологических концентрациях были неэффективны.
Нарушение равновесия между антиоксидантами и прооксидантами характерно для самых различных заболеваний и может служить неспецифическим показателем наличия окислительного стресса. В клинической практике широко используется определение антиоксидантов (АО) в плазме крови человека. Однако плазма крови содержит как специфические АО (токоферол, мочевая кислота, супероксиддимутаза – СОД), так и неспецифические АО (белки). Учитывая, что концентрация белков в плазме значительно выше, чем содержание специфических АО, суммарный вклад специфических и неспецифических АО может оказаться сравнимым.
Целью нашей работы было установление возможного вклада специфических и неспецифических АО в общую антирадикальную активность (АРА) плазмы крови. АРА определяли [Арутюнян и др., 2000] с использованием метода, предложенного В.А.Костюком для оценки активности СОД [Kostyuk, Potapovich, 1990]. Метод основан на ингибировании АО реакции автоокисления кверцетина в щелочной среде. В своей работе мы изучили АРА активность ряда низкомолекулярных АО (аскорбиновая кислота, восстановленный глутатион, мочевая кислота, цистеин) и белков плазмы крови (сывороточный альбумин, фибриноген) при условии их физиологической концентрации в исследуемом образце.
Мы обнаружили, что образцы, содержавшие физиологические концентрации низкомолекулярных АО не ингибировали автоокисление кверцетина.
На следующих этапах мы оценили вклад специфического антиоксидантного фермента СОД. Образцы, содержащие СОД в относительно высоких концентрациях (1-100 мг/л), что сравнимо с его содержанием в клетках, проявили значительную АРА. Однако пробы, содержавшие 0,05-0,4 мг СОД/л (физиологические концентрации для плазмы крови), были неэффективны. Пробы, содержавшие сывороточный альбумин (фракция V по Кону, препараты НПО «Аллерген» и Sigma) в физиологической концентрации 35 г/л, показали АРА, достоверно не отличимую от АРА нативной плазмы крови. С другой стороны, высокоочищенный альбумин (99% чистоты, препараты Serva и «Диа-М») указанной активности не проявил. Интересно, что препараты сывороточного альбумина, обладавшие и не обладавшие АРА, имеют различный хроматографический профиль. Фибриноген при повышении концентрации в образцах от физиологических до патологических продемонстрировал прооксидантное действие на использованной модели.
Таким образом, наши результаты показали, что неспецифическое действие белковых компонентов способно вносить существенный вклад в АРА плазмы крови.
оформление библиографической ссылки
Артемьева Ю.С., Рогачёва Е.П. Неспецифическая антирадикальная активность низкомолекулярных и белковых компонентов плазмы крови // 4-я национальная научно-практическая конференция с международным участием «Активные формы кислорода, оксид азота, антиоксиданты и здоровье человека». Смоленск, Россия, 26-30 сентября 2005 г. Сб. трудов. Смоленск, 2005. С.6-8.